Panliten iki nduduhake yen jamur simbiotik rhizosfer *Kosakonia oryziphila* NP19 sing diisolasi saka oyod pari minangka biopestisida sing ningkatake pertumbuhan tanduran lan biopestisida kanggo ngontrol blas pari sing disebabake dening *Pyricularia oryzae*. Eksperimen in vitro ditindakake ing godhong seger saka bibit pari melati saka varietas Khao Dawk Mali 105 (KDML105). Asil kasebut nuduhake yen NP19 kanthi efektif nyegah perkecambahan konidia *Pyricularia oryzae*. Infeksi *Pyricularia oryzae* dihambat ing telung kondisi perawatan sing beda: pisanan, pari dijajah karo NP19 lan diinokulasi karo konidia *Pyricularia oryzae*; kapindho, campuran konidia NP19 lan *Pyricularia oryzae* ditrapake ing godhong;
Bakteri rhizosfer *Kosakonia oryziphila* NP1914diisolasi saka oyot pari (*Oryza sativa* L. cv. RD6). *Kosakonia oryziphila* NP19 nduweni sipat ningkatake pertumbuhan tanduran, kalebu fiksasi nitrogen, produksi asam indoleasetat (IAA), lan solubilisasi fosfat. Menariknya, *Kosakonia oryziphila* NP19 ngasilake kitinase.14.Aplikasi *Kosakonia oryziphila* NP19 ing wiji pari KDML105 ningkatake kaslametan pari sawise infeksi blas pari. Tujuan saka panliten iki yaiku kanggo (i) njlentrehake mekanisme penghambatan *Kosakonia oryziphila* NP19 nglawan blas pari lan (ii) nyelidiki efek *Kosakonia oryziphila* NP19 ing ngontrol blas pari.
Nutrisi nduweni peran penting ing pertumbuhan lan perkembangan tanduran, dadi faktor sing ngontrol macem-macem penyakit mikroba. Nutrisi mineral tanduran nemtokake resistensi penyakit, karakteristik morfologi utawa jaringan, lan virulensi, utawa kemampuan kanggo urip nglawan patogen. Fosfor bisa ngalangi perkembangan lan nyuda keruwetan blast beras kanthi nambah sintesis senyawa fenolik. Kalium umume nyuda kedadeyan akeh penyakit beras, kayata blast beras, bercak godhong bakteri, bercak selubung godhong, busuk batang, lan bercak godhong. Panliten dening Perrenoud nuduhake yen pupuk kalium sing dhuwur uga bisa nyuda kedadeyan penyakit jamur beras lan nambah panen. Akeh panliten sing nuduhake yen pupuk belerang bisa nambah resistensi tanduran marang patogen jamur.27Magnesium (komponen klorofil) sing berlebihan bisa nyebabake bledosan pari.21Seng bisa langsung mateni patogen, saengga bisa nyuda keruwetan penyakit.22Uji coba lapangan nuduhake yen sanajan konsentrasi fosfor, kalium, belerang, lan seng ing lemah lapangan luwih dhuwur tinimbang ing eksperimen pot, blast pari isih nyebar liwat godhong pari. Nutrisi lemah bisa uga ora efektif banget kanggo ngontrol blast pari, amarga kelembapan relatif lan suhu ora cocog kanggo infestasi patogen sing kuwat.
Ing uji coba lapangan, Stenotrophomonas maltophilia, P. dispersa, Xanthomonas sacchari, Burkholderia multivorans, Burkholderia diffusa, Burkholderia vietnamiensis lan C. gleum dideteksi ing kabeh perawatan. Stenotrophomonas maltophilia wis diisolasi saka rhizosfer gandum, oat, timun, jagung, lan kentang lan wis nuduhake biokontrol.aktivitasnglawan Colletotrichum nymphaeae.28 Salajengipun, P. dispersa sampun dilaporake efektif nglawan jamur irengbosok sakaubi jalar.29 Salajengipun, galur R1 saking Xanthomonas sacchari sampun nuduhaken aktivitas antagonistik nglawan blast pari lan bosok malai ingkang disebabaken dening Burkholderiaglumae.30Burkholderia oryzae NP19 bisa nggawe hubungan simbiotik karo jaringan pari nalika perkecambahan lan dadi jamur simbiotik endemik kanggo sawetara varietas pari. Nalika bakteri lemah liyane bisa ngjajah pari sawise transplantasi, jamur blast NP19, sawise ngjajah, mengaruhi pirang-pirang faktor ing mekanisme pertahanan pari nglawan penyakit iki. NP19 ora mung nyegah tuwuhing P. oryzae luwih saka 50% (waca Tabel Tambahan S1 ing lampiran online), nanging uga nyuda jumlah lesi blast ing godhong lan nambah asil pari sing diinokulasi utawa dijajah karo NP19 (RBf, RFf-B, lan RBFf-B) ing uji coba lapangan (Gambar S3).
Jamur Pyricularia oryzae, sing nyebabake blast tanduran, minangka jamur hemittrofik sing mbutuhake nutrisi saka tanduran inang nalika infeksi. Tanduran ngasilake spesies oksigen reaktif (ROS) kanggo nyegah infeksi jamur; Nanging, Pyricularia oryzae nggunakake macem-macem strategi kanggo nglawan ROS sing diasilake inang.31Peroksidase katon nduweni peran ing resistensi patogen, kalebu ikatan silang protein dinding sel, penebalan dinding xilem, produksi ROS, lan netralisasi hidrogen peroksida.32Enzim antioksidan bisa dadi sistem pangumpul ROS tartamtu. Liwat sipat antioksidan, superoksida dismutase (SOD) lan peroksidase (POD) mbantu miwiti respon pertahanan, kanthi SOD dadi garis pertahanan pertama.33Ing pari, aktivitas peroksidase tanduran diinduksi sawise infeksi patogen tanduran kayata *Pyricularia oryzae* lan *Xanthomonas oryzae pv. Oryzae*.32Ing panliten iki, aktivitas peroksidase mundhak ing pari sing dijajah lan/utawa diinokulasi karo *Magnaporthe oryzae* NP19; Nanging, *Magnaporthe oryzae* ora mengaruhi aktivitas peroksidase. Superoksida dismutase (SOD), minangka H₂O₂ sintase, ngatalisis reduksi O₂⁻ dadi H₂O₂. SOD nduweni peran penting ing resistensi tanduran marang macem-macem stres kanthi nyeimbangake konsentrasi H₂O₂ ing njero tanduran, saengga nambah toleransi tanduran marang macem-macem stres³⁴. Ing panliten iki, ing eksperimen pot, 30 dina sawise inokulasi *Magnaporthe oryzae* (30 DAT), aktivitas SOD ing klompok RF lan RBF masing-masing 121,9% lan 104,5% luwih dhuwur tinimbang sing ana ing klompok R, sing nuduhake respon SOD marang infeksi *Magnaporthe oryzae*. Ing eksperimen pot lan lapangan, aktivitas SOD ing beras sing diinokulasi *Magnaporthe oryzae* NP19 yaiku 67,7% lan 28,8% luwih dhuwur tinimbang beras sing ora diinokulasi 30 dina sawise inokulasi. Respon biokimia tanduran dipengaruhi dening lingkungan, sumber stres, lan jinis tanduran³⁵. Aktivitas enzim antioksidan tanduran langsung dipengaruhi dening faktor lingkungan, sing banjur mengaruhi aktivitas enzim antioksidan tanduran kanthi ngowahi komunitas mikroba tanduran.
Jamur penyakit blas padi (Kosakonia oryziphila NP19, nomer aksesi NCBI PP861312) sing digunakake ing panliten iki yaiku galur13diisolasi saka oyot kultivar pari RD6 ing Provinsi Nakhon Phanom, Thailand (16° 59′ 42.9″ N 104° 22′ 17.9″ E). Galur iki dibudidayakake ing kaldu nutrisi (NB) ing suhu 30°C lan 150 rpm sajrone 18 jam. Kanggo ngetung konsentrasi bakteri, absorbansi suspensi bakteri ing 600 nm diukur. Konsentrasi suspensi bakteri diatur dadi10⁶CFU/mL nganggo banyu deionisasi steril (dH₂OJamur blas pari (Pyricularia oryzae) diinokulasi ing media agar dekstrosa kentang (PDA) lan diinkubasi ing suhu 25°C sajrone 7 dina. Miselium jamur kasebut dipindhah menyang media agar dedak pari (dedak pari 2% (w/v), sukrosa 0,5% (w/v), lan agar 2% (w/v) sing dilarutake ing banyu deionisasi, pH 7) lan diinkubasi ing suhu 25°C sajrone 7 dina. Godhong sing wis disterilisasi saka kultivar pari sing rentan (KDML105) dilebokake ing miselium kanggo nginduksi konidia lan diinkubasi ing suhu 25°C sajrone 5 dina kanthi kombinasi sinar UV lan putih. Konidia dikumpulake kanthi ngusap miselium lan permukaan godhong sing kena infeksi kanthi alon-alon nganggo 10 ml larutan Tween 20 0,025% (v/v) sing wis disterilisasi. Larutan jamur kasebut disaring liwat wolung lapisan kain kasa kanggo mbusak miselium, agar, lan godhong pari. Konsentrasi konidia ing suspensi diatur dadi 5 × 10⁵ konidia/ml kanggo analisis luwih lanjut.
Kultur seger sel Kosakonia oryziphila NP19 disiapake kanthi budidaya ing medium NB ing suhu 37 °C sajrone 24 jam. Sawise sentrifugasi (3047 × g, 10 menit), pelet sel dikumpulake, dicuci kaping pindho nganggo larutan saline fosfat 10 mM (PBS, pH 7.2), lan disuspensi maneh ing buffer sing padha. Kapadhetan optik suspensi sel diukur ing 600 nm, entuk nilai kira-kira 1.0 (padha karo 1.0 × 10⁷ CFU/μl sing ditemtokake kanthi plating ing piring agar nutrisi). Konidia P. oryzae dipikolehi kanthi nggantungake ing larutan PBS lan ngetung nggunakake hemocytometer. Suspensi *K. oryziphila* NP19 lan *P. Kanggo eksperimen apusan godhong, konidia K. oryziphila* disiapake ing godhong pari seger kanthi konsentrasi 1,0 × 10⁷ CFU/μL lan 5,0 × 10² konidia/μL. Cara nyiyapake sampel pari kaya ing ngisor iki: Godhong pari dawane 5 cm dipotong lan dilebokake ing cawan Petri sing dilapisi kertas penyerap sing lembab. Lima klompok perawatan digawe: (i) R: godhong pari tanpa inokulasi bakteri minangka kontrol, ditambah larutan Tween 20 0,025% (v/v); (ii) RB + F: pari sing diinokulasi karo K. oryziphila NP19, ditambah 2 μL suspensi konidia jamur penyebab blast pari; (iii) R + BF: Pari ing klompok R ditambah 4 μl campuran suspensi konidia jamur blast lan K. oryziphila NP19 (rasio volume 1:1); (iv) R + F: Beras ing grup R sing ditambah 2 μl suspensi konidia jamur blast; (v) RF + B: Beras ing grup R sing ditambah 2 μl suspensi konidia jamur blast diinkubasi sajrone 30 jam, banjur 2 μl K. oryziphila NP19 ditambahake ing panggonan sing padha. Kabeh cawan Petri diinkubasi ing suhu 25°C ing peteng sajrone 30 jam banjur dilebokake ing sangisore cahya terus-terusan. Saben grup dibentuk kaping telu. Sawise 72 jam kultur, jaringan tanduran diamati lan dianalisis kanthi mikroskop elektron pindai (SEM). Secara ringkes, jaringan tanduran difiksasi ing buffer fosfat sing ngemot 2,5% (v/v) glutaraldehida lan didehidrasi liwat serangkaian larutan etanol. Sawise pangatusan titik kritis nganggo karbon dioksida, sampel kasebut dilapisi emas lan pungkasane ditliti nggunakake mikroskop elektron pindai.15
Wektu kiriman: 15 Desember 2025