Protein DELLA dilestarekake masterpengatur wutahsing nduweni peran utama kanggo ngontrol pangembangan tanduran kanggo nanggepi isyarat internal lan lingkungan. DELLA tumindak minangka regulator transkripsi lan direkrut kanggo target promotor kanthi ngiket faktor transkripsi (TFs) lan histone H2A liwat domain GRAS. Panaliten anyar nuduhake manawa stabilitas DELLA diatur kanthi otomatis liwat rong mekanisme: polyubiquitination sing disebabake dening phytohormone gibberellin, sing nyebabake degradasi kanthi cepet, lan konjugasi modifiers kaya ubiquitin cilik (SUMO) kanggo nambah akumulasi. Kajaba iku, aktivitas DELLA diatur kanthi dinamis dening rong glikosilasi sing beda: interaksi DELLA-TF ditingkatake kanthi O-fucosylation nanging dicegah dening modifikasi N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) sing disambungake O. Nanging, peran fosforilasi DELLA tetep ora jelas, amarga studi sadurunge wis nuduhake asil sing bertentangan, wiwit saka sing nuduhake yen fosforilasi ningkatake utawa nyuda degradasi DELLA marang wong liya sing nuduhake yen fosforilasi ora mengaruhi stabilitas. Ing kene, kita ngenali situs fosforilasi ing REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) diresiki saka Arabidopsis thaliana kanthi analisis spektrometri massa lan nuduhake yen fosforilasi saka rong peptida RGA ing wilayah PolyS lan PolyS / T ningkatake aktivitas RGA H2A lan nambah. Asosiasi RGA karo target promotor. Utamane, fosforilasi ora mengaruhi interaksi RGA-TF utawa stabilitas RGA. Panaliten kita nyritakake mekanisme molekuler sing fosforilasi nyebabake kegiatan DELLA.
Kanggo njlentrehake peran fosforilasi ing ngatur fungsi DELLA, penting kanggo ngenali situs fosforilasi DELLA ing vivo lan nindakake analisis fungsional ing tanduran. Kanthi pemurnian afinitas ekstrak tanduran sing diterusake karo analisis MS / MS, kita nemtokake sawetara fosfosit ing RGA. Ing kahanan kekurangan GA, fosforilasi RHA mundhak, nanging fosforilasi ora mengaruhi stabilitas. Sing penting, tes co-IP lan ChIP-qPCR ngandharake yen fosforilasi ing wilayah PolyS / T RGA ningkatake interaksi karo H2A lan asosiasi karo promotor target, ngungkapake mekanisme sing fosforilasi ngindhuksi fungsi RGA.
RGA direkrut kanggo target kromatin liwat interaksi subdomain LHR1 karo TF lan banjur diikat menyang H2A liwat wilayah PolyS / T lan subdomain PFYRE, mbentuk kompleks H2A-RGA-TF kanggo nyetabilake RGA. Fosforilasi Pep 2 ing wilayah PolyS / T ing antarane domain DELLA lan domain GRAS kanthi kinase sing ora dingerteni nambah pengikatan RGA-H2A. Protein mutan rgam2A ngilangi fosforilasi RGA lan nggunakake konformasi protein sing beda kanggo ngganggu ikatan H2A. Iki nyebabake destabilisasi interaksi TF-rgam2A sementara lan disosiasi rgam2A saka target kromatin. Tokoh iki mung nggambarake represi transkripsi sing dimediasi RGA. Pola sing padha bisa diterangake kanggo aktivasi transkripsi sing dimediasi RGA, kajaba kompleks H2A-RGA-TF bakal ningkatake transkripsi gen target lan dephosphorylation saka rgam2A bakal nyuda transkripsi. Gambar diowahi saka Huang et al.21.
Kabeh data kuantitatif dianalisis kanthi statistik nggunakake Excel, lan beda sing signifikan ditemtokake nggunakake uji t Student. Ora ana cara statistik digunakake kanggo preliminarily nemtokake ukuran sampel. Ora ana data sing ora kalebu saka analisis; eksperimen ora acak; panliti ora wuta kanggo distribusi data sajrone eksperimen lan evaluasi asil. Ukuran sampel dituduhake ing legenda tokoh lan file data sumber.
Kanggo informasi luwih lengkap babagan desain sinau, waca Abstrak Laporan Portofolio Alam sing ana gandhengane karo artikel iki.
Data proteomik spektrometri massa wis disumbang menyang konsorsium ProteomeXchange liwat repositori mitra PRIDE66 kanthi pengenal dataset PXD046004. Kabeh data liyane sing dipikolehi sajrone panliten iki ditampilake ing Informasi Tambahan, File Data Tambahan, lan File Data Mentah. Data sumber kasedhiya kanggo artikel iki.
Wektu kirim: Nov-08-2024