Panggunaan pestisida sintetis sing nyebar wis nyebabake akeh masalah, kalebu munculé organisme sing tahan, degradasi lingkungan, lan ngrusak kesehatan manungsa. Mulane, mikroba anyarpestisidaSing aman kanggo kesehatan manungsa lan lingkungan dibutuhake banget. Ing panliten iki, biosurfaktan rhamnolipid sing diasilake dening Enterobacter cloacae SJ2 digunakake kanggo ngevaluasi keracunan marang larva nyamuk (Culex quinquefasciatus) lan rayap (Odontotermes obesus). Asil kasebut nuduhake yen ana tingkat kematian sing gumantung dosis antarane perawatan. Nilai LC50 (konsentrasi letal 50%) ing 48 jam kanggo biosurfaktan rayap lan larva nyamuk ditemtokake nggunakake metode pas kurva regresi nonlinier. Asil kasebut nuduhake yen nilai LC50 48 jam (interval kapercayan 95%) saka aktivitas larvisida lan antirayap saka biosurfaktan yaiku 26,49 mg/L (kisaran 25,40 nganti 27,57) lan 33,43 mg/L (kisaran 31,09 nganti 35,68). Miturut pamriksan histopatologis, perawatan nganggo biosurfaktan nyebabake kerusakan parah ing jaringan organel larva lan rayap. Asil panliten iki nuduhake yen biosurfaktan mikroba sing diasilake dening Enterobacter cloacae SJ2 minangka alat sing apik banget lan duweni potensi efektif kanggo ngontrol Cx. quinquefasciatus lan O. obesus.
Negara-negara tropis ngalami akeh penyakit sing ditularake nyamuk1. Relevansi penyakit sing ditularake nyamuk wis nyebar. Luwih saka 400.000 wong mati amarga malaria saben taun, lan sawetara kutha gedhe ngalami epidemi penyakit serius kayata dengue, demam kuning, chikungunya lan Zika.2 Penyakit sing ditularake vektor ana gandhengane karo siji saka enem infeksi ing saindenging jagad, kanthi nyamuk sing nyebabake kasus sing paling signifikan3,4. Culex, Anopheles lan Aedes minangka telung genera nyamuk sing paling umum ana gandhengane karo transmisi penyakit5. Prevalensi demam berdarah, infeksi sing ditularake dening nyamuk Aedes aegypti, wis tambah sajrone dasawarsa kepungkur lan nyebabake ancaman kesehatan masyarakat sing signifikan4,7,8. Miturut Organisasi Kesehatan Dunia (WHO), luwih saka 40% populasi donya beresiko demam berdarah, kanthi 50-100 yuta kasus anyar kedadeyan saben taun ing luwih saka 100 negara9,10,11. Demam berdarah wis dadi masalah kesehatan masyarakat utama amarga kedadeyane wis tambah ing saindenging jagad12,13,14. Anopheles gambiae, sing umum dikenal minangka nyamuk Anopheles Afrika, minangka vektor malaria manungsa sing paling penting ing wilayah tropis lan subtropis15. Virus West Nile, ensefalitis St. Louis, ensefalitis Jepang, lan infeksi virus jaran lan manuk ditularake dening nyamuk Culex, sing asring diarani nyamuk omah biasa. Kajaba iku, dheweke uga dadi pembawa penyakit bakteri lan parasit16. Ana luwih saka 3.000 spesies rayap ing donya, lan wis ana luwih saka 150 yuta taun17. Umume hama urip ing lemah lan mangan kayu lan produk kayu sing ngemot selulosa. Rayap India Odontotermes obesus minangka hama penting sing nyebabake kerusakan parah ing tanduran penting lan wit-witan perkebunan18. Ing wilayah pertanian, infestasi rayap ing macem-macem tahapan bisa nyebabake kerusakan ekonomi sing gedhe banget ing macem-macem tanduran, spesies wit lan bahan bangunan. Rayap uga bisa nyebabake masalah kesehatan manungsa19.
Masalah resistensi saka mikroorganisme lan hama ing bidang farmasi lan pertanian saiki rumit20,21. Mulane, loro perusahaan kasebut kudu nggoleki antimikroba anyar sing efektif biaya lan biopestisida sing aman. Pestisida sintetis saiki kasedhiya lan wis kabukten nular lan ngusir serangga sing ora migunani sing ora dadi target22. Ing taun-taun pungkasan, riset babagan biosurfaktan wis saya tambah amarga aplikasine ing macem-macem industri. Biosurfaktan migunani banget lan penting ing pertanian, remediasi lemah, ekstraksi minyak bumi, mbusak bakteri lan serangga, lan pangolahan panganan23,24. Biosurfaktan utawa surfaktan mikroba yaiku bahan kimia biosurfaktan sing diasilake dening mikroorganisme kayata bakteri, ragi lan jamur ing habitat pesisir lan wilayah sing tercemar lenga25,26. Surfaktan lan biosurfaktan sing asale saka kimia minangka rong jinis sing dipikolehi langsung saka lingkungan alam27. Macem-macem biosurfaktan dipikolehi saka habitat laut28,29. Mulane, para ilmuwan nggoleki teknologi anyar kanggo produksi biosurfaktan adhedhasar bakteri alami30,31. Kemajuan ing riset kasebut nduduhake pentinge senyawa biologis iki kanggo perlindungan lingkungan32. Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium lan genera bakteri iki minangka wakil sing wis ditliti kanthi apik23,33.
Ana akeh jinis biosurfaktan kanthi macem-macem aplikasi34. Kauntungan sing signifikan saka senyawa kasebut yaiku sawetara duwe aktivitas antibakteri, larvisida, lan insektisida. Iki tegese bisa digunakake ing industri pertanian, kimia, farmasi, lan kosmetik35,36,37,38. Amarga biosurfaktan umume bisa diurai sacara biologis lan migunani kanggo lingkungan, mula digunakake ing program manajemen hama terpadu kanggo nglindhungi tanduran39. Kanthi mangkono, kawruh dhasar wis dipikolehi babagan aktivitas larvisida lan antirayap saka biosurfaktan mikroba sing diasilake dening Enterobacter cloacae SJ2. Kita nliti mortalitas lan owah-owahan histologis nalika kena konsentrasi biosurfaktan rhamnolipid sing beda-beda. Kajaba iku, kita ngevaluasi program komputer Quantitative Structure-Activity (QSAR) sing digunakake sacara wiyar yaiku Ecological Structure-Activity (ECOSAR) kanggo nemtokake keracunan akut kanggo mikroalga, daphnia, lan iwak.
Ing panliten iki, aktivitas antirayap (toksisitas) biosurfaktan sing dimurnèkaké ing macem-macem konsentrasi wiwit saka 30 nganti 50 mg/ml (kanthi interval 5 mg/ml) diuji marang rayap India, O. obesus lan spesies kaping papat) Evaluasi. Larva instar Cx. Larva nyamuk quinquefasciatus. Konsentrasi biosurfaktan LC50 sajrone 48 jam marang O. obesus lan Cx. C. solanacearum. Larva nyamuk diidentifikasi nggunakake metode pas kurva regresi nonlinier. Asil kasebut nuduhake yen kematian rayap mundhak kanthi nambah konsentrasi biosurfaktan. Asil panliten nuduhake yen biosurfaktan kasebut nduweni aktivitas larvisida (Gambar 1) lan aktivitas anti rayap (Gambar 2), kanthi nilai LC50 48 jam (95% CI) yaiku 26,49 mg/L (25,40 nganti 27,57) lan 33,43 mg/l (Gambar 31,09 nganti 35,68), masing-masing (Tabel 1). Babagan toksisitas akut (48 jam), biosurfaktan diklasifikasikake minangka "mbebayani" kanggo organisme sing diuji. Biosurfaktan sing diasilake ing panliten iki nuduhake aktivitas larvisida sing apik banget kanthi mortalitas 100% sajrone 24-48 jam sawise paparan.
Hitung nilai LC50 kanggo aktivitas larvisida. Pas kurva regresi nonlinier (garis padat) lan interval kepercayaan 95% (area sing diarsir) kanggo mortalitas relatif (%).
Hitung nilai LC50 kanggo aktivitas anti rayap. Pas kurva regresi nonlinier (garis padat) lan interval kepercayaan 95% (area sing diarsir) kanggo mortalitas relatif (%).
Ing pungkasan eksperimen, owah-owahan morfologis lan anomali diamati ing mikroskop. Owah-owahan morfologis diamati ing klompok kontrol lan klompok sing diobati kanthi pembesaran 40x. Kaya sing dituduhake ing Gambar 3, gangguan pertumbuhan kedadeyan ing mayoritas larva sing diobati nganggo biosurfaktan. Gambar 3a nuduhake Cx. quinquefasciatus normal, Gambar 3b nuduhake Cx anomali. Nyebabake limang larva nematoda.
Efek dosis biosurfaktan sublethal (LC50) marang perkembangan larva Culex quinquefasciatus. Gambar mikroskop cahya (a) saka Cx normal kanthi pembesaran 40×. quinquefasciatus (b) Cx Abnormal. Nyebabake limang larva nematoda.
Ing panliten iki, pamriksan histologis larva sing diobati (Gambar 4) lan rayap (Gambar 5) nuduhake sawetara kelainan, kalebu pengurangan area weteng lan kerusakan otot, lapisan epitel, lan kulit. Histologi nuduhake mekanisme aktivitas penghambatan biosurfaktan sing digunakake ing panliten iki.
Histopatologi larva Cx instar kaping 4 sing ora diobati normal. larva quinquefasciatus (kontrol: (a,b)) lan diobati nganggo biosurfaktan (perawatan: (c,d)). Panah nuduhake epitel usus (epi), inti (n), lan otot (mu) sing diobati. Bar = 50 µm.
Histopatologi O. obesus sing ora diobati normal (kontrol: (a,b)) lan biosurfaktan sing diobati (perawatan: (c,d)). Panah nuduhake epitel usus (epi) lan otot (mu). Bar = 50 µm.
Ing panliten iki, ECOSAR digunakake kanggo prédhiksi toksisitas akut produk biosurfaktan rhamnolipid marang produsen primer (alga ijo), konsumen primer (kutu banyu) lan konsumen sekunder (iwak). Program iki nggunakake model senyawa struktur-aktivitas kuantitatif sing canggih kanggo ngevaluasi toksisitas adhedhasar struktur molekul. Model kasebut nggunakake piranti lunak struktur-aktivitas (SAR) kanggo ngetung toksisitas akut lan jangka panjang zat marang spesies akuatik. Khususé, Tabel 2 ngringkes perkiraan konsentrasi mematikan rata-rata (LC50) lan konsentrasi efektif rata-rata (EC50) kanggo sawetara spesies. Toksisitas sing dicurigai dikategorikake dadi patang tingkat nggunakake Sistem Klasifikasi lan Pelabelan Bahan Kimia sing Harmonisasi Global (Tabel 3).
Pengendalian penyakit sing ditularake vektor, utamane galur nyamuk lan nyamuk Aedes. Wong Mesir, saiki angel kerja 40,41,42,43,44,45,46. Sanajan sawetara pestisida sing kasedhiya sacara kimia, kayata piretroid lan organofosfat, rada migunani, nanging nduweni risiko sing signifikan kanggo kesehatan manungsa, kalebu diabetes, gangguan reproduksi, gangguan neurologis, kanker, lan penyakit pernapasan. Kajaba iku, suwe-suwe, serangga kasebut bisa dadi tahan marang dheweke13,43,48. Mangkono, langkah-langkah pengendalian biologis sing efektif lan ramah lingkungan bakal dadi metode pengendalian nyamuk sing luwih populer49,50. Benelli51 ngusulake yen pengendalian awal vektor nyamuk bakal luwih efektif ing wilayah kutha, nanging dheweke ora nyaranake panggunaan larvisida ing wilayah pedesaan52. Tom et al 53 uga ngusulake yen pengendalian nyamuk ing tahap sing durung dewasa bakal dadi strategi sing aman lan prasaja amarga luwih sensitif marang agen kontrol 54.
Produksi biosurfaktan dening galur kuat (Enterobacter cloacae SJ2) nuduhake khasiat sing konsisten lan njanjeni. Panliten sadurunge nglaporake yen Enterobacter cloacae SJ2 ngoptimalake produksi biosurfaktan nggunakake parameter fisikokimia26. Miturut panliten kasebut, kahanan optimal kanggo produksi biosurfaktan dening isolat E. cloacae potensial yaiku inkubasi sajrone 36 jam, agitasi ing 150 rpm, pH 7,5, 37 °C, salinitas 1 ppt, glukosa 2% minangka sumber karbon, ragi 1%. Ekstrak kasebut digunakake minangka sumber nitrogen kanggo entuk 2,61 g / L biosurfaktan. Kajaba iku, biosurfaktan dikarakterisasi nggunakake TLC, FTIR lan MALDI-TOF-MS. Iki ngonfirmasi yen rhamnolipid minangka biosurfaktan. Biosurfaktan glikolipid minangka kelas sing paling ditliti sacara intensif saka jinis biosurfaktan liyane55. Iki kasusun saka bagean karbohidrat lan lipid, utamane rantai asam lemak. Ing antarane glikolipid, wakil utama yaiku rhamnolipid lan sophorolipid56. Rhamnolipid ngandhut rong gugus rhamnose sing ana gandhengane karo asam mono- utawa di-β-hidroksidekanoat57. Panggunaan rhamnolipid ing industri medis lan farmasi wis mapan58, saliyane panggunaan anyar minangka pestisida59.
Interaksi biosurfaktan karo wilayah hidrofobik sifon pernapasan ngidini banyu ngliwati rongga stomata, saengga nambah kontak larva karo lingkungan akuatik. Anane biosurfaktan uga mengaruhi trakea, sing dawane cedhak karo permukaan, sing nggampangake larva kanggo ngrayap menyang permukaan lan ambegan. Akibate, tegangan permukaan banyu mudhun. Amarga larva ora bisa nempel ing permukaan banyu, dheweke tiba ing ngisor tangki, ngganggu tekanan hidrostatik, sing nyebabake pengeluaran energi sing berlebihan lan pati amarga klelep38,60. Asil sing padha dipikolehi dening Ghribi61, ing ngendi biosurfaktan sing diasilake dening Bacillus subtilis nuduhake aktivitas larvisida nglawan Ephestia kuehniella. Kajaba iku, aktivitas larvisida Cx. Das lan Mukherjee23 uga netepake efek lipopeptida siklik ing larva quinquefasciatus.
Asil saka panliten iki ana hubungane karo aktivitas larvisida biosurfaktan rhamnolipid nglawan Cx. Pembunuhan nyamuk quinquefasciatus konsisten karo asil sing diterbitake sadurunge. Contone, biosurfaktan berbasis surfaktan sing diasilake dening macem-macem bakteri saka genus Bacillus digunakake. lan Pseudomonas spp. Sawetara laporan awal64,65,66 nglaporake aktivitas mateni larva biosurfaktan lipopeptida saka Bacillus subtilis23. Deepali et al. 63 nemokake manawa biosurfaktan rhamnolipid sing diisolasi saka Stenotropomonas maltophilia duwe aktivitas larvisida sing kuat ing konsentrasi 10 mg/L. Silva et al. 67 nglaporake aktivitas larvisida biosurfaktan rhamnolipid nglawan Ae ing konsentrasi 1 g/L. Aedes aegypti. Kanakdande et al. 68 nglaporake yen biosurfaktan lipopeptida sing diasilake dening Bacillus subtilis nyebabake kematian sakabèhé ing larva Culex lan rayap kanthi fraksi lipofilik Eucalyptus. Kajaba iku, Masendra et al. 69 nglaporake kematian semut pekerja (Cryptotermes cynocephalus Light.) 61,7% ing fraksi n-heksana lan EtOAc lipofilik saka ekstrak mentah E.
Parthipan et al 70 nglaporake panggunaan insektisida biosurfaktan lipopeptida sing diasilake dening Bacillus subtilis A1 lan Pseudomonas stutzeri NA3 marang Anopheles Stephensi, vektor parasit malaria Plasmodium. Dheweke ngamati yen larva lan pupa luwih tahan suwe, duwe periode oviposisi sing luwih cendhek, steril, lan duwe umur sing luwih cendhek nalika diobati nganggo konsentrasi biosurfaktan sing beda. Nilai LC50 sing diamati saka biosurfaktan B. subtilis A1 yaiku 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 lan 7,99 mg/L kanggo kahanan larva sing beda (yaiku larva I, II, III, IV lan tahap pupa). Dibandhingake, biosurfaktan kanggo tahap larva I-IV lan tahap pupa Pseudomonas stutzeri NA3 yaiku 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 lan 6,99 mg/L. Fenologi larva lan pupa sing isih urip sing telat dianggep minangka akibat saka gangguan fisiologis lan metabolisme sing signifikan sing disebabake dening perawatan insektisida71.
Galur Wickerhamomyces anomalus CCMA 0358 ngasilake biosurfaktan kanthi aktivitas larvisida 100% nglawan nyamuk Aedes. Interval 24 jam aegypti 38 luwih dhuwur tinimbang sing dilapurake dening Silva et al. Biosurfaktan sing diasilake saka Pseudomonas aeruginosa nggunakake lenga kembang srengenge minangka sumber karbon wis dituduhake bisa mateni 100% larva sajrone 48 jam 67. Abinaya et al.72 lan Pradhan et al.73 uga nduduhake efek larvisida utawa insektisida saka surfaktan sing diasilake dening sawetara isolat saka genus Bacillus. Panaliten sing diterbitake sadurunge dening Senthil-Nathan et al. nemokake manawa 100% larva nyamuk sing kapapar laguna tanduran cenderung mati. 74.
Neliti efek sublethal saka insektisida marang biologi serangga iku penting banget kanggo program manajemen hama terpadu amarga dosis/konsentrasi sublethal ora mateni serangga nanging bisa nyuda populasi serangga ing generasi mbesuk kanthi ngganggu karakteristik biologis10. Siqueira et al 75 mirsani aktivitas larvisida lengkap (kematian 100%) saka biosurfaktan rhamnolipid (300 mg/ml) nalika dites ing macem-macem konsentrasi wiwit saka 50 nganti 300 mg/ml. Tahap larva galur Aedes aegypti. Dheweke nganalisa efek wektu nganti mati lan konsentrasi sublethal marang kaslametan larva lan aktivitas nglangi. Kajaba iku, dheweke mirsani penurunan kecepatan nglangi sawise 24-48 jam paparan konsentrasi sublethal biosurfaktan (contone, 50 mg/mL lan 100 mg/mL). Racun sing nduweni peran sublethal sing janjeni dianggep luwih efektif kanggo nyebabake kerusakan kaping pirang-pirang marang hama sing kapapar76.
Pengamatan histologis saka asil kita nuduhake yen biosurfaktan sing diasilake dening Enterobacter cloacae SJ2 ngowahi jaringan larva nyamuk (Cx. quinquefasciatus) lan rayap (O. obesus) kanthi signifikan. Anomali sing padha disebabake dening preparasi lenga basil ing An. gambiaes.s lan An. arabica diterangake dening Ochola77. Kamaraj et al.78 uga nggambarake kelainan morfologis sing padha ing An. Larva Stephanie kena nanopartikel emas. Vasantha-Srinivasan et al.79 uga nglaporake yen lenga atsiri shepherd's purse ngrusak banget lapisan kamar lan epitel Aedes albopictus. Aedes aegypti. Raghavendran et al nglaporake yen larva nyamuk diobati nganggo ekstrak miselium 500 mg/ml saka jamur Penicillium lokal. Ae nuduhake kerusakan histologis sing parah. aegypti lan Cx. Tingkat kematian 80. Sadurunge, Abinaya et al. Larva instar kaping papat An ditliti. Stephensi lan Ae. aegypti nemokake akeh owah-owahan histologis ing Aedes aegypti sing diobati nganggo B. licheniformis exopolysaccharides, kalebu sekum lambung, atrofi otot, karusakan lan disorganisasi ganglia tali saraf72. Miturut Raghavendran et al., sawise perawatan nganggo ekstrak miselium P. daleae, sel usus tengah nyamuk sing diuji (larva instar kaping 4) nuduhake pembengkakan lumen usus, penurunan isi antar sel, lan degenerasi nuklir81. Owah-owahan histologis sing padha diamati ing larva nyamuk sing diobati nganggo ekstrak godhong echinacea, sing nuduhake potensi insektisida saka senyawa sing diobati50.
Panggunaan piranti lunak ECOSAR wis nampa pangakuan internasional82. Riset saiki nuduhake yen toksisitas akut biosurfaktan ECOSAR marang mikroalga (C. vulgaris), kutu iwak lan banyu (D. magna) kalebu ing kategori "toksisitas" sing ditetepake dening Perserikatan Bangsa-Bangsa83. Model ekotoksisitas ECOSAR nggunakake SAR lan QSAR kanggo prédhiksi toksisitas akut lan jangka panjang saka zat lan asring digunakake kanggo prédhiksi toksisitas polutan organik82,84.
Paraformaldehida, buffer natrium fosfat (pH 7.4) lan kabeh bahan kimia liyane sing digunakake ing panliten iki dituku saka HiMedia Laboratories, India.
Produksi biosurfaktan ditindakake ing labu Erlenmeyer 500 mL sing ngemot 200 mL medium Bushnell Haas steril sing ditambah karo 1% lenga mentah minangka sumber karbon tunggal. Prakultur Enterobacter cloacae SJ2 (1,4 × 104 CFU/ml) diinokulasi lan dikultur ing shaker orbital ing suhu 37°C, 200 rpm sajrone 7 dina. Sawise periode inkubasi, biosurfaktan diekstrak kanthi sentrifugasi medium kultur ing 3400×g sajrone 20 menit ing suhu 4°C lan supernatan sing diasilake digunakake kanggo tujuan skrining. Prosedur optimasi lan karakterisasi biosurfaktan diadopsi saka panliten sadurunge26.
Larva Culex quinquefasciatus dijupuk saka Pusat Studi Lanjutan Biologi Kelautan (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (India). Larva dikembangke ing wadhah plastik sing diisi banyu deionisasi ing suhu 27 ± 2°C lan fotoperiode 12:12 (padhang:peteng). Larva nyamuk diwenehi larutan glukosa 10%.
Larva Culex quinquefasciatus wis ditemokake ing tangki septik sing mbukak lan ora dilindhungi. Gunakake pedoman klasifikasi standar kanggo ngenali lan ngkultur larva ing laboratorium85. Uji coba larvisida ditindakake miturut rekomendasi saka Organisasi Kesehatan Dunia 86. SH. Larva instar kaping papat quinquefasciatus dikumpulake ing tabung tertutup kanthi klompok 25 ml lan 50 ml kanthi celah udara rong pertiga saka kapasitase. Biosurfaktan (0-50 mg/ml) ditambahake ing saben tabung kanthi individu lan disimpen ing suhu 25 °C. Tabung kontrol mung nggunakake banyu suling (50 ml). Larva sing mati dianggep minangka sing ora nuduhake tandha-tandha nglangi sajrone periode inkubasi (12-48 jam) 87. Hitung persentase kematian larva nggunakake persamaan kasebut. (1)88.
Kulawarga Odontotermitidae kalebu rayap India Odontotermes obesus, sing ditemokake ing kayu bosok ing Kampus Pertanian (Universitas Annamalai, India). Uji biosurfaktan iki (0-50 mg/ml) nggunakake prosedur normal kanggo nemtokake manawa mbebayani. Sawise dikeringake ing aliran udara laminar sajrone 30 menit, saben strip kertas Whatman dilapisi biosurfaktan kanthi konsentrasi 30, 40, utawa 50 mg/ml. Strip kertas sing wis dilapisi lan ora dilapisi diuji lan dibandhingake ing tengah cawan Petri. Saben cawan petri ngemot udakara telung puluh rayap aktif O. obesus. Rayap kontrol lan uji diwenehi kertas teles minangka sumber panganan. Kabeh piring disimpen ing suhu kamar sajrone periode inkubasi. Rayap mati sawise 12, 24, 36 lan 48 jam 89,90. Persamaan 1 banjur digunakake kanggo ngira persentase kematian rayap ing konsentrasi biosurfaktan sing beda. (2).
Sampel-sampel kasebut disimpen ing es lan dikemas ing mikrotube sing ngemot 100 ml buffer natrium fosfat 0,1 M (pH 7,4) lan dikirim menyang Laboratorium Patologi Akuakultur Pusat (CAPL) saka Pusat Akuakultur Rajiv Gandhi (RGCA). Laboratorium Histologi, Sirkali, Mayiladuthurai. Distrik, Tamil Nadu, India kanggo analisis luwih lanjut. Sampel langsung difiksasi ing paraformaldehida 4% ing suhu 37°C sajrone 48 jam.
Sawisé fase fiksasi, bahan kasebut dikumbah kaping telu nganggo buffer natrium fosfat 0,1 M (pH 7,4), didehidrasi kanthi bertahap ing etanol lan direndhem ing resin LEICA sajrone 7 dina. Zat kasebut banjur dilebokake ing cetakan plastik sing diisi resin lan polimerizer, banjur dilebokake ing oven sing dipanasake nganti 37°C nganti blok sing ngemot zat kasebut dipolimerisasi kanthi lengkap.
Sawisé polimerisasi, blok-blok kasebut dipotong nganggo mikrotom LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10.399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48.350, USA) kanthi kekandelan 3 mm. Bagean-bagean kasebut dikelompokake ing slide, kanthi enem bagean saben slide. Slide kasebut dikeringake ing suhu kamar, banjur diwernani nganggo hematoxylin suwene 7 menit lan dicuci nganggo banyu mili suwene 4 menit. Kajaba iku, olesake larutan eosin ing kulit suwene 5 menit lan bilas nganggo banyu mili suwene 5 menit.
Toksisitas akut diprediksi nggunakake organisme akuatik saka macem-macem tingkat tropis: iwak LC50 96 jam, D. magna LC50 48 jam, lan ganggang ijo EC50 96 jam. Toksisitas biosurfaktan rhamnolipid kanggo iwak lan ganggang ijo ditaksir nggunakake piranti lunak ECOSAR versi 2.2 kanggo Windows sing dikembangake dening Badan Perlindungan Lingkungan AS. (Kasedhiya online ing https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Kabeh tes kanggo aktivitas larvisida lan antirayap ditindakake kaping telu. Regresi nonlinier (log variabel respon dosis) saka data kematian larva lan rayap ditindakake kanggo ngetung konsentrasi letal median (LC50) kanthi interval kapercayan 95%, lan kurva respon konsentrasi digawe nggunakake Prism® (versi 8.0, GraphPad Software) Inc., USA) 84, 91.
Panliten iki mbukak potensi biosurfaktan mikroba sing diasilake dening Enterobacter cloacae SJ2 minangka agen larvisida lan antirayap nyamuk, lan karya iki bakal nyumbang kanggo pangerten sing luwih apik babagan mekanisme aksi larvisida lan antirayap. Panliten histologis larva sing diobati nganggo biosurfaktan nuduhake kerusakan ing saluran pencernaan, usus tengah, korteks serebral lan hiperplasia sel epitel usus. Asil: Evaluasi toksikologis aktivitas antirayap lan larvisida biosurfaktan rhamnolipid sing diasilake dening Enterobacter cloacae SJ2 mbukak yen isolat iki minangka biopestisida potensial kanggo ngontrol penyakit sing ditularake vektor saka nyamuk (Cx quinquefasciatus) lan rayap (O. obesus). Ana kabutuhan kanggo mangerteni toksisitas lingkungan sing ndasari biosurfaktan lan potensi dampak lingkungan. Panliten iki nyedhiyakake basis ilmiah kanggo netepake risiko lingkungan saka biosurfaktan.
Wektu kiriman: 09-Apr-2024