Sawijining seri uji coba pilot berbasis gubug ditindakake ing Khowe, Benin kidul, kanggo ngevaluasi efektifitas biologis kelambu generasi sabanjure sing anyar lan sing wis diuji ing lapangan nglawan vektor malaria sing tahan piretrin. Kelambu sing wis umure ing lapangan dicopot saka rumah tangga sawise 12, 24, lan 36 sasi. Potongan jaring sing dipotong saka kabeh ITN dianalisis komposisi kimia lan bioassay kerentanan ditindakake sajrone saben uji coba kanggo neliti owah-owahan resistensi insektisida ing populasi vektor Khowe.
Interceptor® G2 ngluwihi ITN liyane, sing ngonfirmasi kaunggulan jaring piretroid lan klorfenapir tinimbang jinis jaring liyane. Antarane produk anyar, kabeh ITN generasi sabanjure nuduhake bioefikasi sing luwih apik tinimbang Interceptor®; nanging, gedhene perbaikan iki suda sawise penuaan lapangan amarga daya tahan senyawa non-piretroid sing luwih cendhek. Asil kasebut nyoroti kabutuhan kanggo ningkatake persistensi insektisida ITN generasi sabanjure.
InsektisidaKelambu sing diobati (ITN) wis nduweni peran penting kanggo nyuda morbiditas lan mortalitas malaria sajrone 20 taun kepungkur. Wiwit taun 2004, luwih saka 3 milyar ITN wis disebar ing saindenging jagad, lan panliten pemodelan nuduhake yen 68% kasus malaria ing Afrika sub-Sahara bisa dicegah antarane taun 2000 lan 2015. Sayange, resistensi populasi vektor malaria marang piretroid (kelas insektisida standar sing digunakake ing ITN) wis tambah akeh, ngancam efektifitas intervensi penting iki. Ing wektu sing padha, kemajuan ing kontrol malaria wis saya alon sacara global, kanthi sawetara negara kanthi beban dhuwur ngalami peningkatan kasus malaria wiwit taun 2015. Tren kasebut wis ndorong pangembangan generasi anyar produk ITN inovatif sing tujuane kanggo ngatasi ancaman resistensi piretroid lan mbantu nyuda beban iki lan entuk target global sing ambisius.
Saiki ana telung ITN generasi anyar ing pasar, saben-saben nggabungake piretroid karo insektisida utawa sinergis liyane sing bisa ngatasi resistensi piretroid ing vektor malaria. Ing taun-taun pungkasan, sawetara uji coba terkontrol acak kluster (RCT) wis ditindakake kanggo netepake efektifitas epidemiologis jaring kasebut dibandhingake karo jaring standar mung piretroid lan kanggo nyedhiyakake bukti sing dibutuhake kanggo ndhukung rekomendasi Organisasi Kesehatan Dunia (WHO). Kelambu sing nggabungake piretroid karo piperonil butoksida (PBO), sinergis sing nambah efektifitas piretroid kanthi nyegah enzim detoksifikasi nyamuk, minangka sing pertama direkomendasikake dening WHO sawise rong produk (Olyset® Plus lan PermaNet® 3.0) nuduhake dampak epidemiologis sing unggul dibandhingake karo kelambu mung piretroid ing uji coba terkontrol acak kluster ing Tanzania lan Uganda. Nanging, luwih akeh data sing dibutuhake kanggo nemtokake nilai kesehatan masyarakat saka kelambu piretroid-PBO ing Afrika Kulon, ing ngendi resistensi piretroid sing parah bisa nyuda mupangate dibandhingake karo kelambu mung piretroid.
Kegigihan insektisida ITN biasane ditaksir kanthi ngumpulake jaring saka komunitas kanthi periodik lan nguji ing bioassay laboratorium nggunakake galur nyamuk sing dikembangbiakan serangga. Sanajan uji coba iki migunani kanggo njlentrehake bioavailabilitas lan efektifitas insektisida ing permukaan kelambu sajrone wektu, nanging menehi informasi winates babagan efektifitas komparatif saka macem-macem jinis kelambu generasi sabanjure amarga metode lan galur nyamuk sing digunakake kudu diadaptasi karo mode aksi insektisida sing dikandung. Tes gubug eksperimental minangka pendekatan alternatif sing bisa digunakake kanggo ngevaluasi efektifitas jaring sing diobati insektisida ing studi daya tahan ing kahanan sing niru interaksi alami antarane inang nyamuk liar lan kelambu rumah tangga sajrone panggunaan. Pancen, studi pemodelan anyar nggunakake pengganti entomologis kanggo data epidemiologis wis nuduhake yen kematian nyamuk lan tingkat mangan sing diukur ing uji coba iki bisa digunakake kanggo prédhiksi dampak ITN marang kedadeyan lan prevalensi malaria ing RCT kluster. Dadi, uji coba eksperimen berbasis gubug ing ngendi kelenjar getah bening sing diolah insektisida sing dikumpulake ing lapangan kalebu ing RCT kluster bisa nyedhiyakake data sing penting babagan bioefikasi komparatif lan persistensi insektisida kelenjar getah bening sing diolah insektisida sajrone umur sing diarepake, lan mbantu napsirake asil epidemiologis saka panliten kasebut.
Tes gubug eksperimental minangka simulasi habitat manungsa standar sing disaranake dening Organisasi Kesehatan Dunia kanggo ngevaluasi efektifitas kelambu sing diwenehi insektisida. Tes iki niru kahanan paparan ing jagad nyata sing diadhepi inang nyamuk nalika sesambungan karo kelambu rumah tangga lan mulane minangka pendekatan sing cocog banget kanggo neliti efektifitas biologis kelambu sing digunakake sajrone umur layanan sing diarepake.
Panliten iki ngevaluasi efektifitas entomologis saka telung jinis kelambu insektisida generasi anyar (PermaNet® 3.0, Royal Guard® lan Interceptor® G2) ing kahanan lapangan ing lumbung eksperimen lan mbandhingake karo kelambu standar sing mung nganggo piretrin (Interceptor®). Kabeh kelambu sing diobati insektisida iki kalebu ing dhaptar prakualifikasi WHO kanggo kontrol vektor. Karakteristik rinci saben kelambu diwenehake ing ngisor iki:
Ing Maret 2020, kampanye distribusi kelambu sing wis diwasa ing lapangan ditindakake ing desa-desa gubug ing Prefektur Zou, Benin kidul, kanggo uji coba pilot ing gubug. Kelambu Interceptor®, Royal Guard® lan Interceptor® G2 dipilih saka kluster sing dipilih kanthi acak ing kotamadya Kove, Zagnanado lan Ouinhi minangka bagean saka studi observasi daya tahan sing disusun ing kluster RCT kanggo netepake efektifitas epidemiologis kelambu sing diobati insektisida ganda. Kelambu PermaNet® 3.0 dikumpulake ing desa Avokanzun cedhak kutha Jija lan Bohicon (7°20′ N, 1°56′ E) lan disebarake bebarengan karo kelambu kluster RCT sajrone kampanye massal Program Pengendalian Malaria Nasional 2020. Gambar 1 nuduhake lokasi kluster/desa studi ing ngendi jinis ITN sing beda-beda dikumpulake relatif marang situs gubug eksperimen.
Uji coba pondok pilot ditindakake kanggo mbandhingake kinerja entomologis ITN Interceptor®, PermaNet® 3.0, Royal Guard® lan Interceptor® G2 nalika dicopot saka rumah tangga ing 12, 24 lan 36 sasi sawise diseminasi. Ing saben titik wektu taunan, kinerja ITN sing wis tuwa ing lapangan dibandhingake karo jaring anyar sing ora digunakake saka saben jinis lan jaring sing ora diobati minangka kontrol negatif. Ing saben titik wektu taunan, total 54 sampel replika ITN sing wis tuwa ing lapangan lan 6 ITN anyar saka saben jinis diuji ing 1 utawa 2 uji coba pondok replika kanthi rotasi perawatan saben dina. Sadurunge saben uji coba pondok, indeks porositas rata-rata jaring lapangan sing wis tuwa saka saben jinis ITN diukur miturut rekomendasi WHO. Kanggo simulasi keausan lan sobekan saka panggunaan saben dina, kabeh ITN anyar lan jaring kontrol sing ora diobati dilubangi nganggo enem bolongan 4 x 4 cm: loro ing saben panel sisih dawa lan siji ing saben panel sisih cendhak, miturut rekomendasi WHO. Kelambu dipasang ing njero gubug kanthi ngiket pinggiran lembaran gendheng nganggo tali menyang paku ing pojok ndhuwur tembok gubug. Perawatan ing ngisor iki dievaluasi ing saben uji coba gubug:
Jaring sing wis diwasa ing lapangan dievaluasi ing gubug eksperimen ing taun sing padha nalika jaring kasebut dicopot. Uji coba gubug ditindakake ing lokasi sing padha wiwit Mei nganti September 2021, April nganti Juni 2022, lan Mei nganti Juli 2023, kanthi jaring dicopot sawise 12, 24, lan 36 sasi. Saben uji coba suwene siji siklus perawatan lengkap (54 wengi sajrone 9 minggu), kajaba 12 sasi, nalika rong siklus perawatan berturut-turut ditindakake kanggo nambah ukuran sampel nyamuk. Miturut desain kothak Latin, perawatan dirotasi saben minggu antarane gubug eksperimen kanggo ngontrol efek lokasi gubug, dene sukarelawan dirotasi saben dina kanggo ngontrol bedane daya tarik nyamuk saka saben inang. Nyamuk dikumpulake 6 dina saben minggu; ing dina kaping 7, sadurunge siklus rotasi sabanjure, gubug diresiki lan diwenehi ventilasi kanggo nyegah infestasi.
Titik pungkasan khasiat utama kanggo perawatan gubug eksperimental nglawan nyamuk Anopheles gambiae sing tahan piretroid lan perbandingan ITN generasi sabanjure karo jaring Interceptor® khusus piretroid yaiku:
Titik akhir khasiat sekunder kanggo perawatan gubug eksperimental nglawan nyamuk Anopheles gambiae sing tahan piretroid yaiku kaya ing ngisor iki:
Penahanan (%) – pangurangan tingkat mlebu menyang klompok sing diobati dibandhingake karo klompok sing ora diobati. Pitungane kaya ing ngisor iki:
ing ngendi Tu minangka jumlah nyamuk sing kalebu ing klompok kontrol sing ora diobati, lan Tt minangka jumlah nyamuk sing kalebu ing klompok sing diobati.
Tingkat Churn (%) – Tingkat churn amarga potensi iritasi saka perawatan, dituduhake minangka proporsi lemut sing diklumpukake ing balkon.
Koefisien penekanan pengisap darah (%) yaiku pangurangan proporsi nyamuk pengisap darah ing klompok sing diobati dibandhingake karo klompok kontrol sing ora diobati. Cara pitungan kaya ing ngisor iki: ing ngendi Bfu minangka proporsi nyamuk pengisap darah ing klompok kontrol sing ora diobati, lan Bft minangka proporsi nyamuk pengisap darah ing klompok sing diobati.
Pangurangan kesuburan (%) — pangurangan proporsi nyamuk subur ing klompok sing diobati dibandhingake karo kontrol sing ora diobati. Cara pitungan kaya ing ngisor iki: ing ngendi Fu minangka proporsi nyamuk subur ing klompok kontrol sing ora diobati, lan Ft minangka proporsi nyamuk subur ing klompok sing diobati.
Kanggo ngawasi owah-owahan profil resistensi populasi vektor Covè sajrone wektu, WHO nganakake bioassay in vitro lan vial ing taun sing padha saben uji coba hut eksperimen (2021, 2022, 2023) kanggo netepake kerentanan marang AI ing ITN sing ditliti lan kanggo menehi informasi interpretasi asil. Ing panliten in vitro, nyamuk dipaparake ing kertas filter sing diobati nganggo konsentrasi alfa-sipermetrin (0,05%) lan deltametrin (0,05%) sing wis ditemtokake, lan ing botol sing dilapisi konsentrasi CFP (100 μg/botol) lan PPF (100 μg/botol) sing wis ditemtokake kanggo netepake kerentanan marang insektisida kasebut. Intensitas resistensi piretroid diselidiki kanthi mbabarake nyamuk menyang konsentrasi diferensial 5 kali lipat (0,25%) lan 10 kali lipat (0,50%) saka α-sipermetrin lan deltametrin. Pungkasan, kontribusi sinergi PBO lan overekspresi sitokrom P450 monooksigenase (P450) marang resistensi piretroid ditaksir kanthi lemut sing wis kena paparan konsentrasi α-sipermetrin (0,05%) lan deltametrin (0,05%) sing beda, lan sadurunge kena paparan PBO (4%). Kertas saring sing digunakake kanggo tes tabung WHO dituku saka Universitas Sains Malaysia. Botol tes bioassay WHO nggunakake CFP lan PPF disiapake miturut rekomendasi WHO.
Lemut sing digunakake kanggo bioassay dikumpulake ing tahap larva saka lokasi pembiakan cedhak gubug eksperimen lan banjur diternak nganti diwasa. Ing saben wektu, paling ora 100 lemut kena saben perawatan sajrone 60 menit, kanthi 4 ulangan saben tabung/botol lan kira-kira 25 lemut saben tabung/botol. Kanggo paparan piretroid lan CFP, lemut sing ora dipakani umur 3-5 dina digunakake, dene kanggo PPF, lemut sing ngisep getih umur 5-7 dina digunakake kanggo ngrangsang oogenesis lan netepake efek PPF ing reproduksi lemut. Paparan paralel ditindakake nggunakake kertas saring sing diresapi lenga silikon, PBO sing resik (4%), lan botol sing dilapisi aseton minangka kontrol. Ing pungkasan paparan, lemut dipindhah menyang wadhah sing ora diobati lan kena kapas sing direndhem ing larutan glukosa 10% (w/v). Mortalitas dicathet 24 jam sawise paparan piretroid lan saben 24 jam sajrone 72 jam sawise paparan CFP lan PPF. Kanggo neliti kerentanan marang PPF, lemut sing isih urip sing kena PPF lan kontrol negatif sing cocog dibedah sawise kematian sing ditundha dicathet, perkembangan ovarium diamati nggunakake mikroskop majemuk, lan kesuburan ditaksir miturut tahap perkembangan endhog Christopher [28, 30]. Yen endhog wis berkembang kanthi lengkap nganti tahap Christopher V, lemut kasebut diklasifikasikake minangka subur, lan yen endhog durung berkembang kanthi lengkap lan tetep ana ing tahap I-IV, lemut kasebut diklasifikasikake minangka steril.
Ing saben wektu sajrone setaun, potongan 30 × 30 cm dipotong saka jaring anyar lan sing wis diwasa ing lokasi sing ditemtokake ing rekomendasi WHO [22]. Sawise dipotong, jaring kasebut diwenehi label, dibungkus nganggo foil aluminium lan disimpen ing kulkas ing suhu 4 ± 2 °C kanggo nyegah migrasi AI menyang kain. Jaring kasebut banjur dikirim menyang Pusat Riset Pertanian Walloon ing Belgia kanggo analisis kimia kanggo ngukur owah-owahan ing total isi AI sajrone umur layanan. Metode analitis sing digunakake (adhedhasar metode sing disaranake dening Komite Koperasi Internasional kanggo Analisis Pestisida) wis diterangake sadurunge [25, 31].
Kanggo data uji coba gubug eksperimen, jumlah total nyamuk urip/mati, sing nyokot/ora nyokot, lan sing subur/steril ing kompartemen gubug sing beda-beda dijumlah kanggo saben perawatan ing saben uji coba kanggo ngetung macem-macem asil proporsional (mortalitas 72 jam, nyokot, ektoparasitisme, jebakan jaring, kesuburan) lan interval kapercayan 95% (CI) sing cocog. Bedane antarane perawatan kanggo asil biner proporsional iki dianalisis nggunakake regresi logistik, dene bedane kanggo asil cacah dianalisis nggunakake regresi binomial negatif. Amarga rong siklus rotasi perawatan ditindakake saben 12 wulan lan sawetara perawatan diuji ing uji coba, analisis penetrasi nyamuk disesuaikan karo jumlah dina saben perawatan diuji. ITN anyar kanggo saben asil uga dianalisis kanggo entuk perkiraan tunggal kanggo kabeh titik wektu. Saliyane variabel panjelasan utama perawatan, saben model kalebu gubug, wong sing turu, periode uji coba, indeks aperture ITN, lan dina minangka efek tetep kanggo ngontrol variasi amarga beda ing wong sing turu lan daya tarik gubug individu, musiman, status kelambu, lan dispersi sing berlebihan. Analisis regresi ngasilake rasio odds (OR) sing wis diatur lan interval kapercayan 95% sing cocog kanggo ngira-ira efek ITN generasi anyar dibandhingake karo jaring piretroid, Interceptor®, babagan asil utama kematian lan fekunditas nyamuk. Nilai P saka model uga digunakake kanggo menehi huruf kompak sing nuduhake signifikansi statistik ing tingkat 5% kanggo kabeh perbandingan pasangan saka asil utama lan sekunder. Kabeh analisis regresi ditindakake ing Stata versi 18.
Kerentanan populasi vektor Covese diinterpretasikake adhedhasar mortalitas lan fekunditas sing diamati in vitro lan bioassay botol miturut rekomendasi Organisasi Kesehatan Dunia. Asil analisis kimia nyedhiyakake total isi AI ing fragmen ITN, sing digunakake kanggo ngetung tingkat retensi AI ing jaring umur lapangan dibandhingake karo jaring anyar ing saben titik wektu saben taun. Kabeh data dicathet kanthi manual ing formulir standar banjur dilebokake kaping pindho menyang database Microsoft Excel.
Komite Etik Kementerian Kesehatan Benin (No. 6/30/MS/DC/DRFMT/CNERS/SA), London School of Hygiene & Tropical Medicine (LSHTM) (No. 16237) lan Organisasi Kesehatan Dunia (No. ERC.0003153) nyetujoni pelaksanaan uji coba pilot hut sing nglibatake sukarelawan. Persetujuan tertulis dijupuk saka kabeh sukarelawan sadurunge melu ing panliten iki. Kabeh sukarelawan nampa kemoprofilaksis gratis kanggo nyuda risiko malaria, lan perawat tugas sajrone uji coba kanggo neliti sukarelawan sing ngalami gejala demam utawa reaksi sing ora becik marang produk tes kasebut.
Asil lengkap saka gubug eksperimen, sing ngringkes jumlah total nyamuk urip/mati, sing keluwen/sing mangan getih, lan sing subur/steril kanggo saben klompok eksperimen, uga statistik deskriptif ditampilake minangka materi tambahan (Tabel S1).
Ing gubug eksperimental ing Kowa, Benin, pemberian getih nyamuk Anopheles gambiae liar sing tahan piretroid dikurangi. Data saka kontrol sing ora diobati lan jaring anyar dikumpulake ing saben uji coba kanggo menehi perkiraan khasiat tunggal. Kanthi analisis regresi logistik, kolom kanthi huruf umum ora beda sacara signifikan ing tingkat 5% (p > 0,05). Batang kesalahan makili interval kapercayan 95%.
Mortalitas lemut Anopheles gambiae sing tahan piretroid liar mlebu ing gubug eksperimen ing Kowa, Benin. Data saka kontrol sing ora diobati lan jaring anyar dikumpulake ing saben uji coba kanggo menehi prakiraan khasiat tunggal. Kanthi analisis regresi logistik, kolom kanthi huruf umum ora beda sacara signifikan ing tingkat 5% (p > 0,05). Batang kesalahan makili interval kapercayan 95%.
Rasio odds nggambarake bedane mortalitas nganggo kelambu generasi anyar dibandhingake karo kelambu sing mung nganggo piretroid. Garis putus-putus nuduhake rasio odds 1, sing nuduhake ora ana bedane mortalitas. Rasio odds > 1 nuduhake mortalitas sing luwih dhuwur nganggo kelambu generasi anyar. Data kanggo kelambu generasi anyar dikumpulake ing saben uji coba kanggo ngasilake siji prakiraan efektifitas. Batang kesalahan nuduhake interval kapercayan 95%.
Senajan Interceptor® nduduhake angka kematian paling endhek saka kabeh ITN sing dites, penuaan lapangan ora nduweni dampak negatif marang kematian vektor. Nyatane, Interceptor® anyar nyebabake kematian 12%, dene jaring sing wis umur lapangan nuduhake peningkatan tipis ing 12 sasi (17%, p=0,006) lan 24 sasi (17%, p=0,004), sadurunge bali menyang level sing padha karo jaring anyar ing 36 sasi (11%, p=0,05). Kosok baline, tingkat kematian kanggo generasi sabanjure jaring sing diobati insektisida mboko sithik mudhun sawise disebarake. Penurunan paling jelas karo Interceptor® G2, ing ngendi kematian mudhun saka 58% karo jaring anyar dadi 36% ing 12 sasi (p< 0,001), 31% ing 24 sasi (p< 0,001), lan 20% ing 36 sasi (p< 0,001). PermaNet® 3.0 anyar nyebabake pangurangan angka kematian dadi 37%, sing uga mudhun sacara signifikan dadi 20% ing 12 sasi (p< 0,001), 16% ing 24 sasi (p< 0,001), lan 18% ing 36 sasi (p< 0,001). Tren sing padha diamati karo Royal Guard®, kanthi mesh anyar sing nyebabake pangurangan angka kematian nganti 33%, banjur pengurangan sing signifikan dadi 21% ing 12 sasi (p< 0,001), 17% ing 24 sasi (p< 0,001) lan 15% ing 36 sasi (p< 0.001).
Pangurangan fekunditas lemut Anopheles gambiae sing tahan piretroid liar sing mlebu ing gubug eksperimen ing Kwa, Benin. Data saka kontrol sing ora diobati lan jaring anyar dikumpulake ing saben uji coba kanggo menehi prakiraan khasiat tunggal. Batang kanthi huruf umum ora beda sacara signifikan ing tingkat 5% (p > 0,05) kanthi analisis regresi logistik. Batang kesalahan makili interval kapercayan 95%.
Rasio odds nggambarake bedane kesuburan karo kelambu generasi anyar dibandhingake karo kelambu sing mung nganggo piretroid. Garis putus-putus nggambarake rasio 1, sing nuduhake ora ana bedane kesuburan. Rasio odds< 1 nuduhake penurunan kesuburan sing luwih gedhe karo kelambu generasi anyar. Data kanggo kelambu generasi anyar dikumpulake ing saben uji coba kanggo ngasilake siji prakiraan efektifitas. Batang kesalahan makili interval kapercayan 95%.
Wektu kiriman: 17 Februari 2025